《生物实验室系列：转染实验技术》覆盖了转染前目的基因的获取、载体的选择，多种转染技术，转染技术的应用等。作为一本实验技术类书籍，《生物实验室系列：转染实验技术》不仅较详细地阐述了有关技术的具体操作和程序，更着力于对各种技术的基本原理及其相关理论基础进行深层次的剖析。
　　《生物实验室系列：转染实验技术》不仅可作为从事生命科学，特别是分子生物学相关领域工作者的实验室必备参考工具书，同：时也可供高校相关专业师生及科学工作者对转染实验技术的理论做深入探讨时参考。

出版者的话
前言
第1章 转染实验技术概述
1.1 转染实验技术简介
1.2 转染实验技术的分类及原理
1.3 转染实验技术的应用
1.4 新材料与新技术在转染实验技术中的应用
参考文献
第2章 目的基因的获取
2.1 目的基因概述
2.2 化学合成法获取目的基因
2.3 基因组文库钓取目的基因
2.4 cDNA文库钓取目的基因
2.5 PCR获取目的基因
2.6 RT-PCR法获取目的基因
参考文献
第3章 基因表达载体的选择
3.1 基因表达载体概述
3.2 基因表达载体分类
3.3 基因表达载体的遗传标记
3.4 常用原核基因表达质粒载体
3.5 常用真核基因表达质粒载体
3.6 病毒型表达载体
3.7 可表达融合蛋白的载体［11］
3.8 基因表达载体的改造
参考文献
第4章 重组子的构建与鉴定
4.1 限制性内切酶
4.2 黏断连接方法及重点技术
4.3 平端连接方法及重点技术
4.4 酶切位点的改造和连接
4.5 重组子的筛选与鉴定
参考文献
第5章 化学转染方法将重组体导入真核细胞
5.1 磷酸钙共沉淀法
5.2 DEAE-葡聚糖法转染
5.3 脂质体介导的转染
5.4 纳米材料介导的转染
参考文献
第6章 物理转染方法将重组体导入真核细胞
6.1 显微注射法转染
6.2 电穿孔法转染
6.3 基因枪转染
参考文献
第7章 病毒转染方法将重组体导入真核细胞
7.1 病毒转染系统概述
7.2 包装细胞概述
7.3 高浓度病毒原液的收集及滴度测定方法
7.4 病毒转染的辅助系统
7.5 腺病毒介导的转染
7.6 反转录病毒介导的转染
参考文献
第8章 转染成功细胞的选择
8.1 遗传报道基因系统
8.2 报道基因的同位素分析法
8.3 报道基因的非同位素分析法
参考文献
第9章 转染技术的应用
9.1 转基因动物及基因敲除动物
9.2 转基因植物
9.3 基因制药
9.4 基因治疗
9.5 RNA干扰治疗
参考文献

　　前言
　　转染指真核细胞由于外源DNA掺入而获得新的遗传标志的过程。DNA是分子生物学研究的主要对象，而转染技术不仅是进行DNA研究的有效手段，也是分子生物学实验技术中最基本、最重要的操作方法。随着转染技术的快速发展，它必将对现代分子生物学产生巨大的影响。熟练掌握转染技术是科研人员开展科研工作所必需。
　　《转染实验技术》是《生物实验室系列》图书之一。在本书的编写过程中，我们总结多年的科研实践经验，系统地介绍了目的基因获取、载体选择、多种转染方法以及转染技术的应用。在编写中我们力求内容准确且通俗易懂，语言流畅简练、深入浅出。本书读者对象定位于生物技术及相关专业师生，同时也可供相关科研人员参考。
　　本书在编写过程中，得到了化学工业出版社有关领导和编辑的鼎力支持和帮助，得到了其他科研机构的支持与鼓励，在此一并表示感谢。
　　限于编者的水平及时间关系，书中难免存在不足之处，敬请同行专家和使用本书的读者批评指正。
　　马文丽
　　2013年2月于广州

　　第1章　转染实验技术概述
　　1.1　转染实验技术简介
　　1.1.1　转染实验技术的概念
　　受到自然界中大肠杆菌经常相互分享它们的遗传物质的启发，人类发明了将DNA/RNA导入培养细胞的技术，即转染实验技术，这是分子生物学的又一个重要的里程碑。转染实验技术又叫基因转染技术（gene transfection，gene transfer，gene delivery），是采用一定的方法和途径将外源分子如DNA、RNA等导入特定的细胞，并表达目的基因，产生特定功能的蛋白质分子。外源基因或DNA整合到宿主细胞基因组中并得以传递给子代与表达，称为稳定转染（stable transfection）。外源基因或DNA被转染进入宿主细胞但不整合进入宿主细胞基因组且有瞬时表达，称为不稳定转染（unstable transfection）。两个或多个基因或DNA同时转染靶细胞称为共转染（cotransfection）。通过转染而表达外源基因的受体细胞称为转染子（transfectant）。转染实验技术是基因功能研究、基因治疗、基因免疫的理论和技术基础，也是研究基因表达调控、突变分析等的常规工具。正是因为这种技术的不断进步，我们可以在各种哺乳动物细胞中进行各种克隆化基因的表达，从而达到不同的目的。比如，生产制备大量经过真核特有的翻译后加工的活性蛋白；研究表达蛋白的结构和生化特性；研究基因表达的调控机理；调控基因的表达等。转染技术的广泛使用，不仅促进了人们对外源基因在哺乳动物细胞中的表达等方面的认识，并且在方法学上促进了该领域及相关领域的发展。
　　1.1.2　外源基因转染真核细胞的目的、意义
　　随着分子生物学技术的不断发展，在真核表达质粒的研究中，为便于检测目的基因的表达情况或研究外源基因的其他功能，常把真核表达质粒在体外转染到一些哺乳动物细胞，通过目的基因在体外培养细胞中的表达来研究其生物学功能。常用的表达系统主要分为两类：一类是采用真核表达载体转染DNA的瞬时表达系统或稳定表达系统；另一类是采用病毒载体的表达系统。病毒载体虽然具有高转染率、能够持续稳定地表达外源基因的特点，但因为病毒载体需整合到转染细胞的染色体中才能够使外源基因得以表达，所以具有致癌、致畸的危险。安全性较差这一缺陷已成为限制病毒载体广泛应用的主要原因。真核表达质粒是一种核酸，它不同于病原体，在自然状态下没有感染性，以附加体的形式存在于被转染的靶细胞的胞体内，不被体外培养的细胞吸附，当细胞增殖时独立地表达外源基因。它不需要整合于转染细胞的染色体内，因而具有安全性高的优点。